主题：【原创】这是真的吗？Maxipreps concentration＝4163.1ng/ul？！ -- 大鹏翔宇
俺还连瓶底都不满呢
在lab里俺是新兵。像萨姆兄说的：“新兵就是要在各位大虾的帮助下一步一步成长起来的。”
谢谢您了。
另--- 想找大虾请教一下关于机械的问题,俺该去哪呢? 最近萨姆的老爷车出了点小毛病....
咱也讲的是咱怎么提的质粒啊,只要是DNA,就能设法浓缩一点,所以浓度高肯定不是问题,问题是产量/纯度
质粒本身的结构通常被认为是决定质粒产量的主要因素,但是通常maxiprep的KIT,其限制性因素是柱子本身的容量,150mlLB,培养像pBlue这样的质粒,我用传统的裂解/PEG纯化,稍微用心一点1mg产量是肯定不止的,如果用KIT,超过容量的部分,都被洗脱了.那么柱子的最大容量是多少呢?这个就highly depends on RP了,呵呵.
花谢大鹏兄。
通常不会有问题。
关于浓度的问题，不用担心，用最大质粒提取试剂盒的时候，因为你是用洗脱液最后将在树脂上吸附的质粒给洗脱下来，所以，加的洗脱液的体积与最后的浓度直接相关。我们用150毫升菌液提取的时候，大体上可以回收到1.5-3毫克的DNA,如果用1毫升洗脱液，那么最后的浓度一般为1.5-3毫克每毫升。没什么奇怪的。如果用的洗脱液浓度体积进一步缩小，浓度也会相应提高。
理论上，最大质粒提取试剂盒每一支可以最大吸附7毫克的DNA。只不过一般很难见到罢了，我曾经用250毫升菌液得到过5毫克每毫升的浓度。
这次也许是你这次人品坚挺（呵呵），加油，好好干！
质粒图：
TK
SV40
电泳图：
1.DNA 1kb ladder
2.TK(1000×dilution)
3.TK＋BamHI
4.TK＋BamHI＋Xba-I
5.TK＋BamHI＋BglII
6.SV40(1000×dilution)
7.SV40＋BamHI
8.SV40＋BamHI＋Xba-I
9.SV40＋BamHI＋BglII
师兄师姐说看上去没问题，还说这个浓度破了实验室的记录了。
这个酶切对吗？
老了！
您哪里老了吗？！
我这个新兵还得向您多请教关于我课题的选择呢！
再说咱这门本来就没有新老一说，活到老学到老，很正常啊，毛主席他老师的教导嘛！
这是生化.
These "bands" are DNA fragments. 
DNA molecues have also been tried in making computer chips. It worked, but........
做PCR的装置啊？
难道已经应用在电脑上了？难道我四年前的胡思乱想实现了？
请仔细讲一讲啊，花先送上。